HuH-7細(xì)胞由日本Okayama大學(xué)Nakabayshi,H. & Sato,J.等人于1982年從一名57歲日本男性的高分化肝細(xì)胞癌腫瘤組織中分離建立。是研究肝病發(fā)病機(jī)制、HCV病毒復(fù)制機(jī)制及開發(fā)開病毒藥物的理想模型。
細(xì)胞基本信息:
HuH-7, JTC-39
上皮樣,貼壁生長

是(其中兩個(gè)位點(diǎn)的鑒定結(jié)果)

病毒污染檢測:
通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測病毒基因組片段,結(jié)果顯示16種常見病毒均為陰性。
培養(yǎng)基:
90% DMEM + 10%FBS(該細(xì)胞系可在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng),細(xì)胞在生長過程中會向培養(yǎng)基中釋放包括含甲胎蛋白在內(nèi)的血清蛋白。)
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):
HuH-7 細(xì)胞所用 DMEM 培養(yǎng)基要求
用于 HuH-7 細(xì)胞培養(yǎng)的 DMEM(杜爾貝科改良伊格爾培養(yǎng)基)為低葡萄糖 DMEM 培養(yǎng)基。標(biāo)準(zhǔn) DMEM 培養(yǎng)基即低葡萄糖配方,高葡萄糖 DMEM 是其改良版本。
切勿使用高葡萄糖 DMEM 培養(yǎng)基。已有多項(xiàng)報(bào)道指出,在 HuH-7 細(xì)胞培養(yǎng)中使用高葡萄糖 DMEM 會引發(fā)諸多問題。
標(biāo)準(zhǔn) DMEM 培養(yǎng)基含有 L - 谷氨酰胺、丙酮酸鈉和低濃度葡萄糖(1克/升)。培養(yǎng)基中不應(yīng)添加 HEPES(4-羥乙基哌嗪乙磺酸)。
培養(yǎng)初始階段的培養(yǎng)瓶(培養(yǎng)皿)規(guī)格
HuH-7 細(xì)胞解凍后能否立即存活,取決于細(xì)胞密度。請將一個(gè)凍存管中的所有細(xì)胞接種到1 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶或1 個(gè) 6 厘米培養(yǎng)皿中。
接種前需通過短暫離心去除二甲基亞砜(DMSO)。
復(fù)蘇培養(yǎng)和傳代時(shí),若細(xì)胞稀釋度過高,可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡或生長遲緩。
傳代操作
對細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化時(shí),需使用足量的胰酶溶液,之后通過短暫離心收集細(xì)胞。
若胰酶溶液用量不足,可能導(dǎo)致細(xì)胞干燥,進(jìn)而對細(xì)胞造成損傷。
蛋白分泌:
據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,該細(xì)胞在培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的血清蛋白有:白蛋白、前白蛋白、α1-抗胰蛋白酶、銅藍(lán)蛋白、纖維蛋白原、纖連蛋白、結(jié)合珠蛋白、血紅素結(jié)合蛋白、β-脂蛋白、α2-巨球蛋白、β2-微球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、脂蛋白、α2-巨球蛋白、β2-微球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補(bǔ)體成分C3和C4以及甲胎蛋白。在完全明確成分的合成培養(yǎng)基中生長的這些肝癌細(xì)胞系,可能為體外研究人肝癌細(xì)胞的生長與代謝提供新的途徑。
支持HCV復(fù)制:
是首個(gè)被證實(shí)支持丙型肝炎病毒(HCV) 全長復(fù)制的細(xì)胞系,是HCV研究的重要細(xì)胞模型。
自2006年起,比歐聯(lián)科便與JCRB展開了合作。比歐聯(lián)科憑借自身在國際運(yùn)輸、特殊物品和生物材料進(jìn)口的專業(yè)性的優(yōu)勢,為用戶提供外貿(mào)+物流+清關(guān)一體化解決方案,全方位保障細(xì)胞產(chǎn)品安全、準(zhǔn)時(shí)送達(dá)用戶手中。JCRB(Japanese Collection of Research Bioresources)現(xiàn)已正式授權(quán)比歐聯(lián)科作為其在中國大陸地區(qū)的官方經(jīng)銷商,全面負(fù)責(zé)JCRB產(chǎn)品在中國的市場推廣與銷售工作。
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參考文獻(xiàn)
Growth of human hepatoma cells lines with differentiated functions in chemically defined medium.Nakabayashi H,Taketa K,Miyano K,Yamane T,Sato J Cancer Res. 1982 Sep;42(9):3858-63